2025-08-01
研究背景
微波消融（MWA)是一種微創的腫瘤治療技術，它利用微波產生的熱能來直接摧毀腫瘤組織。研究表明，微波消融可以激發全身免疫反應以控制轉移或殘留腫瘤，即遠隔效應。然而，消融介導的遠隔效應較弱，難以持續殺傷腫瘤。
既往研究發現，微波消融聯合嵌合抗原受體（CAR）T細胞可以有效抑制遠隔腫瘤，但是該聯合療法僅對靶抗原均質腫瘤有較好療效，難以殺傷抗原異質性腫瘤。針對這一難題，廣州醫科大學附屬第二醫院廣州朱康順教授團隊構建可分泌SIRPα（CV1）的sCAR-T細胞，驗證了其在聯合微波消融時可增強對遠隔抗原異質性腫瘤的遠隔效應，并揭秘其增強機制。派森諾生物為該研究提供了單細胞 RNA 測序（scRNA-seq）分析服務。
論文題目：CV1-secreting sCAR-T cells potentiate the abscopal effect of microwave ablation in heterogeneous tumors
影響因子：10.6
研究思路
研究結果
1、sCAR-T細胞能增強MWA的遠隔效應，使控制遠處抗原異質性腫瘤成為可能
作者構建了多種腫瘤治療方案小鼠模型，包括GPC3-msCART（可靶向chGPC3并分泌CV1）、GPC3-mCART靶向chGPC3等。與其它治療方案相比，MAmsCART在消融腫瘤方面表現更優。MAmsCART治療顯著抑制了未消融腫瘤，而MACART治療組僅獲得中度的非消融性腫瘤抑制效果。這提示在采用MACART治療時，除了sCAR-T細胞外，其他內源性免疫細胞在控制腫瘤方面也發揮著重要作用。
2、利用scRNA-seq技術在異質性腫瘤聯合治療中鑒定腫瘤浸潤免疫細胞
對非消融PDX腫瘤中MACART和MAsCART腫瘤團塊中的CD45免疫細胞進行了分選，使用單細胞RNA測序（scRNA-seq）分析。 scRNA-seq分析顯示，兩治療組之間上述細胞的總數沒有顯著差異。然而，與MACART相比，MAsCART中M1巨噬細胞的比例有增加的趨勢。這些觀察結果提供了一個可能，即MWA和CAR-T細胞的抗腫瘤作用可能與巨噬細胞有關。
3、在MAsCART治療后，巨噬細胞而非內源性T細胞在異質腫瘤中的遠隔效應中起關鍵作用
接著作者發現CD8T細胞淋巴細胞耗竭并不能阻止MAmsCART治療在具有異質性腫瘤的小鼠中刺激遠處效應。并通過實驗進一步驗證了MAmsCART組中觀察到的遠處效應至少不是主要依賴于宿主T細胞對遠處腫瘤的細胞毒性。與MACART組相比，MAmsCART組具有炎癥特征的巨噬細胞（CD68、C1QA、CCL3、CCL4和CXCL2）數量增加。表達這些炎癥標志物的巨噬細胞與更好的抗腫瘤特性有關，從而確保了與MAmsCART治療相關的更好的遠處效應。這些觀察結果表明，MAmsCART治療的遠處效應是由巨噬細胞對具有抗原異質性的癌細胞的吞噬能力介導的。
4、消融的腫瘤增強趨化因子的產生對于招募引發遠端效應的巨噬細胞至關重要
相對于對照組，在單獨MWA治療或MWA聯合治療中均觀察到未消融腫瘤中巨噬細胞的浸潤增加。對水浴SK-HEP-1-GPC3細胞的bulk RNA-seq、ELISA數據進行分析后發現，可招募巨噬細胞的幾種趨化因子升高，包括CSF1、CCL26、CXCL8等。鑒于已有研究表明癌細胞分泌的CSF1能招募巨噬細胞到腫瘤中，作者進一步調查了CSF1是否與遠隔效應有關。研究發現，當消融細胞進行Csf1基因敲除時，募集到未消融位點的巨噬細胞數量減少。這些數據表明，HCC細胞在消融腫瘤部位分泌CSF1有助于巨噬細胞遷移至未消融腫瘤部位，從而誘導遠隔效應。
5、sCAR-T細胞分泌CV1克服M2巨噬細胞免疫抑制，在異質腫瘤的消融效應中發揮關鍵作用
MAsCART在未消融腫瘤中誘導的遠隔效應優于MACART，這引發了這樣一個問題：CD47-SIRPa軸的阻斷劑CV1是否通過增強巨噬細胞的吞噬作用以驅動遠隔效應？相比之下，含有GPC3-msCART上清液的共培養物中干擾素（IFN）-g的分泌量明顯更高。這表明，GPC3-msCART細胞可以逆轉M2巨噬細胞的功能性免疫抑制，促進免疫激活和腫瘤裂解。這些數據支持這樣的假設，即腫瘤中局部msCAR-T細胞增殖和激活后，腫瘤內可能會出現更高的CV1濃度。KEGG分析顯示，MAsCART組中吞噬體基因相對于MACART組富集。更重要的是，這種體外效應并沒有伴隨著外周血紅細胞和免疫細胞或血清生化物質的明顯變化。這些數據證明了msCAR-T細胞改善吞噬免疫抑制的能力，很可能是通過CV1的分泌來實現的。
6、MAsCART誘導的體外效應也適用于其他異質實體瘤
MWA不僅常用于HCC患者，還用于肺癌、胰腺癌和乳腺癌患者以及其他10種實體腫瘤患者。作者在NOG小鼠的幾種異種移植模型中觀察到了巨噬細胞依賴的遠隔效應。此外，為了密切模擬臨床患者中實體腫瘤的異質性，作者建立了肺癌和乳腺癌的患者源性異種移植PDX模型。在這些PDX模型中觀察到了遠隔效應，以及巨噬細胞向未消融腫瘤部位的募集，這表明消融誘導的遠位反應可能不僅限于HCC，也可能存在于需要MWA治療的其他原發性或轉移性腫瘤中。這些結果突出了MWA聯合CAR-T治療方案的臨床轉化價值。
小 結
該研究創新性聚焦于未接受消融治療的遠端腫瘤免疫微環境，首次提出 “sCAR-T 細胞療法與 MWA 聯合應用以強化遠隔效應” 的治療方案。該策略通過特異性阻斷 “別吃我” 信號通路中 CD47 與 SIRPα 的相互作用，形成對肝癌 “精準靶向攻擊 + 全域協同清除” 的多層次治療體系，為提升肝癌 MWA 治療效果、降低術后復發轉移風險開辟了新的解決路徑。
